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          熒光定量PCR耗材的使用和選擇注意事項
          更新時間:2022-03-29瀏覽:2459次

            熒光定量PCR耗材的使用和選擇注意事項


            PCR板

            PCR板是一種在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中主要作為參與擴增反應(yīng)的引物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模板核酸、Mg、緩沖液等的承載物。

            PCR板材質(zhì)

            其本身材質(zhì)在當(dāng)今主要以聚丙烯(PP)為主,能更好適應(yīng)PCR反應(yīng)過程中反復(fù)高低溫設(shè)定,并且能夠?qū)崿F(xiàn)高溫高壓滅菌操作。為配合排槍、PCR儀等實現(xiàn)高通量操作,較常使用的為96孔或384孔的PCR板。板型符合SBS國際標(biāo)準(zhǔn),且為適應(yīng)不同廠家的PCR儀,根據(jù)裙邊設(shè)計又可分為無裙邊、半裙邊、升裙邊和全裙邊四種設(shè)計模式。

            PCR板常見顏色

            有透明和白色,其中白色更適合用于新型的實時熒光定量PCR。

            PCR板用途

            廣泛應(yīng)用于遺傳、生化、免疫、醫(yī)藥等領(lǐng)域,不僅應(yīng)用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎(chǔ)研究,還可用于疾病的診斷或任何有DNA,RNA的地方,屬于實驗室一次性易耗品。

            如何正確使用96孔PCR孔板

            PCR板有透明和乳白色可選,其中乳白色更適合用于頂部采集熒光信號的新型熒光定量PCR儀(如伯樂CFX系列,ABI 7500fast 以上型號, Roche 480系列),但如果熒光定量PCR儀是底部光源的,則應(yīng)選擇透明的。

            PCR板根據(jù)裙邊設(shè)計又可分為無裙邊、半裙邊和全裙邊三種設(shè)計模式,不同廠家的熒光定量PCR儀會設(shè)計不同的切角或邊緣凸起,請選擇適合該PCR儀的板子。

            PCR板又分100ul體積(矮板)和200ul體積(高板),根據(jù)機型的不同選擇,選擇不同高度孔板,避免高度錯誤對機器造成破壞和加熱不均導(dǎo)致數(shù)據(jù)失真。

            當(dāng)使用96孔板做熒光定量PCR實驗的時候,推薦使用光學(xué)膜代來密封反應(yīng)孔。正確的封膜方法是:先沿著96孔板的縱向壓膜,然后橫向,最后沿著板的邊緣按壓使之密封。具體手法見下面圖示:

            加樣后會在管壁上飛濺一些小液滴,另外反應(yīng)體系內(nèi)也會有一些氣泡,需要離心去掉掛壁液滴和氣泡。請使用專用的微孔板離心機解決上述問題。

            PCR板屬于一次性消耗品,生產(chǎn)一次成型,不建議剪開使用容易造成實驗誤差增加,不能清洗或部分重復(fù)利用。不要為了節(jié)省一點小錢,而給實驗帶來后續(xù)分析上的困擾。

            熒光定量PCR耗材的使用和選擇注意事項,先和大家介紹到這,如果想要了解更多熒光定量PCR耗材的信息,可以關(guān)注天津本生生物,專業(yè)給生物行業(yè)客戶提供生物實驗室檢測耗材,歡迎廣大客戶來詢。


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